我們常說(shuō)過(guò)柱子其實(shí)就是柱層析分離，也叫柱色譜，1903年由俄羅斯科學(xué)家第一次發(fā)明使用，其把植物色素的溶液經(jīng)過(guò)粉碎的碳酸鈣粉末，發(fā)現(xiàn)從上到下在碳酸鈣粉末上有不同的色帶，通過(guò)對(duì)不同色帶的分開提取，得到了較純?nèi)~綠素，葉黃素等。

該方法經(jīng)過(guò)經(jīng)過(guò)百年的發(fā)展至今已經(jīng)比較成熟，固定相也從單一的碳酸鈣粉末發(fā)展到了氧化鋁（又分為酸性、中性、堿性），硅膠，活性炭等，其中各大實(shí)驗(yàn)室常用的便是硅膠，一般分為正相硅膠和反相硅膠！

固定相（硅膠）一般要經(jīng)過(guò)純化和活性處理，顆粒大小應(yīng)當(dāng)均勻統(tǒng)一，理論上其顆粒越小、同單位質(zhì)量表面積越大，吸附能力就越高，分離效果也就越好。但是實(shí)際使用中固定相的顆粒太小時(shí)往往會(huì)存在兩個(gè)情況，一個(gè)是其質(zhì)更輕，容易飄散在空氣中（硅膠進(jìn)入人體無(wú)法降解，越細(xì)越毒）；二是顆粒小也會(huì)導(dǎo)致顆粒之間縫隙小，從而使溶劑的流速就太慢，耗時(shí)；以硅膠為例，目前已經(jīng)商業(yè)化用量最大的硅膠尺寸為200-300目。

過(guò)柱手段這塊，除了前面說(shuō)的正向循環(huán)制備，高效液相制備，過(guò)柱機(jī)這些自動(dòng)分析的設(shè)備，手動(dòng)過(guò)柱方面主要分為常壓過(guò)柱，減壓過(guò)柱，加壓過(guò)柱三種。

其中減壓過(guò)柱，因?yàn)橄疵搫┝魉龠^(guò)快，會(huì)損失大半部分塔板數(shù)，分離效果較差，適合分離TLC板子分的比較開的樣品，尤其適合產(chǎn)物只有一個(gè)大極性雜質(zhì)的樣品；所有其大多數(shù)時(shí)間被用于化合物的預(yù)處理，過(guò)掉部分雜質(zhì)后再仔細(xì)純化。要注意的是，使用過(guò)程中因?yàn)樨?fù)壓帶來(lái)的溶劑揮發(fā)，會(huì)導(dǎo)致柱子外表面大量水珠凝結(jié)，對(duì)水敏感的化合物不要輕易嘗試。

常壓過(guò)柱是三者中分離效果更好的一種過(guò)柱方式，但是因?yàn)楹芏鄷r(shí)候溶劑走的太慢，分離效果再好也會(huì)影響效率，所以這時(shí)候一般會(huì)給與壓力，這就是所謂加壓過(guò)柱；但這個(gè)壓力不宜過(guò)高，一般手動(dòng)的用雙鏈球，自動(dòng)的就用個(gè)養(yǎng)魚泵，兩者都可以改裝一下。

（內(nèi)容來(lái)源：有機(jī)大菜仔）